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ANG-1厂家,进口人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒

型    号:
所属分类:人Elisa试剂盒
报    价:¥¥2,600.00
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人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒的每道工序都严格按照国家检测标准执行,质量保证的同时,价格也相当实惠

ANG-1厂家,进口人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒产品概述:

使用目的:

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒含量。

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算样品浓度。

人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒组成

 48孔配置 96孔配置 保存
  说明书 1份 1份
  封板膜 2片(48) 2片(96)
  密封袋 1个 1个
  酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
  标准品:13.5U/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
  标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
  酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
  20倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 30ml×1瓶 2-8℃保存

标本要求 

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒操作步骤

标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

12 nmol/L

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

6 nmol/L

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

3 nmol/L

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

1.5 nmol/L

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

0.75 nmol/L

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 

人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8℃。

2.有效期:6个月

 

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