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劲马技术探讨:ELISA实验条件把控
点击次数:16次 发布时间:2019-06-26 返回

    上海劲马ELISA试剂盒每一盒售出的都按照严格的生产工艺,确保ELISA试剂盒品质,不断地在免疫和分子生物学尖端领域探索,经过多年的技术积累,试剂盒现已涵盖20个种属,上千余种指标,为广大支持我们的客户带来更多、更优秀。在ELISA中,进行各项实验条件的选择十分重要,今日上海劲马就带您大概了解一下实验条件的选择包括哪些:

    一、固相载体的选择:
    载体的种类有多种,如聚苯乙烯,聚氯乙烯和纤维素等,我们通常用的聚苯乙烯塑料微量滴定板,其优点在于吸附蛋白的性能较好,操作简便、用量小、适于大批检测。

    二、载体的吸附条件:
    载体的吸附均为物理吸附,吸附一般要求PH在9.0~9.6之间。时间、温度、蛋白的浓度、离子的强度一定要恰到好处。一般采用4℃过一夜。
   
    三、酶标抗体使用浓度的确定:
    于聚苯乙烯板中加足够的抗体包被温育一定时间, 酶标结合物倍比稀释,找出OD值1,为zui合适酶标抗体稀释度。 

    四、抗原的要求:
    用于ELISA的抗原必须采用相当纯的抗原,如果含有其它杂质,将与抗原共同竞争的固相载体上的有限位置。

    五、抗体的要求:
    一定是要与抗原对应的抗体,化学结构和空间结构上其具有很高特异性反应。

    六、反应时间:
    抗原与抗体、抗体与酶标抗体反应一般在37度1~2小时达到高峰。时间太短敏感性下降,时间太长吸附的抗原或复合物可能脱落。                   

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