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劲马文献:转染胶质细胞源性神经营养因子诱导神经干细胞分化
点击次数:22次 发布时间:2019-06-14 返回

转染胶质细胞源性神经营养因子诱导神经干细胞分化


何 佳1,鄢 波2(1三六三医院神经内科,四川省成都市 610041;2四川大学华西医院神经内科,四川省成都市 610041) 


文章亮点:
神经元在生长、发育和受损时的存活依赖于多种营养因子的作用,其中胶质细胞源性营养因子在促进神经元的生长、分化和修复方面被认为是最有潜力的营养因子。实验采用脂质体法将 PcDNA3-GDNF-GFP 表达质粒成功转染到神经干细胞中,经诱导后神经干细胞能够向神经元以及多巴胺神经元方向分化,从而为细胞移植治疗神经退行性疾病提供实验依据。 
关键词:
干细胞;分化;神经干细胞;基因转染;人胶质细胞源性神经营养因子;神经元;多巴胺能神经元;诱导分化;国家自然科学基金
主题词:神经干细胞;基因;胶质细胞源性神经营养因子;细胞分化;组织工程
基金资助:国家自然科学基金(81201010)
项目名称:HHV-6B 病毒感染诱导炎性网络在颞叶内侧癫痫中的作用机制
缩略语:胶质细胞源性神经营养因子:glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF 
摘要
背景:神经干细胞为神经系统功能重建和神经再生提供了一条新的途径,解决其定向诱导分化问题仍是目前的研究热点。
目的:探讨转染胶质细胞源性神经营养因子基因诱导大鼠胚胎神经干细胞向神经元和多巴胺能神经元分化的作用。
方法:构建 PcDNA3-GDNF-GFP 表达质粒,用脂质体介导该质粒转染大鼠胚胎神经干细胞并进行诱导分化,荧光显微镜观察转染情况,免疫荧光染色检测 β 微管蛋白Ⅲ和酪氨酸羟化酶表达。
结果与结论:胶质细胞源性神经营养因子基因转染后 3 d,可观察到细胞呈绿色荧光细胞球状。诱导分化 7 d,神经干细胞分化为神经元以及多巴胺神经元的比例明显增高。结果表明胶质细胞源性神经营养因子基因可以促进神经干细胞向神经元以及多巴胺能神经元分化。

0 引言 Introduction
神经系统疾病是发生于中枢神经系统、周围神经系统、自主神经系统的以感觉、运动、意识、自主神经功能障碍为主要表现的疾病,尚无效果显著的治疗方法[1-2]。1992年,国外学者Reynoldstffu等[3]从成鼠纹状体和海马中分离出一种特殊的细胞群,通过观察发现,这些细胞群可以不断增殖,并具有良好的分化潜能[14]。随着干细胞理论和相关研究的不断发展,神经干细胞为各种中枢神经系统功能重建和神经再生提供了一条新的途径,但在实验治疗过程
中,神经干细胞存活率较低,影响治疗效果[5]。因此,促进干细胞分化,提高移植干细胞的存活率成为研究热点。胶质细胞源性神经营养因子 (glial cell line-derived eurotrophic factor,GDNF)是一种神经营养因子,其信号通路对多种神经元包括多巴胺神经元等具有良好的调节作用。多巴胺是大脑内帮助神经元之间联络的一种媒介,在人体和哺乳动物的一系列生理活动中发挥重要作用,例如泌乳、睡眠、运动调节、学习和记忆等都离不开多巴胺的参与[6]。实验建立GDNF基因克隆与表达载体,对大鼠胚胎神经干细胞进行GDNF基因转染,观察转染后神经干细胞分化情况,了解其对神经干细胞向神经元和多巴胺能神经元分化的作用机制。

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